Information

Et simpelt spørgsmål om amøbe (Naegleria fowleri)

Et simpelt spørgsmål om amøbe (Naegleria fowleri)



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Jeg har et meget simpelt spørgsmål vedr Naegleria fowleri amøbe. Nogle eksperter hævder, at kogning af vandet i 15 minutter dræber Naegleria. Det har jeg dog undersøgt et sted Naegleria kan blive til cysteformer, når miljøet eller atmosfæren bliver barsk for at beskytte sig selv. Så spørgsmålet er, om det er muligt Naegleria at overleve kogetemperaturen, hvis vandet koges i 15 minutter ved 100 grader celcius ved at omdannes til cysteform og komme ind i næsen af ​​mennesket og dræbe mennesket?


Det har jeg studeret et sted Naegleria kan blive til cysteformer, når miljøet eller atmosfæren bliver barsk for at beskytte sig selv.

Dette er sandt og kan ske af en lang række årsager, herunder ekstrem temperatur (varm eller kold), mangel på mad og overfyldning.

Er det muligt for Naegleria at overleve kogetemperaturen, hvis vandet koges i 15 minutter ved 100 grader celcius ved at omdannes til cysteform og komme ind i næsen af ​​mennesket og dræbe mennesket?

Kort sagt: nej, det er ikke muligt. Ifølge en publikation fra Environmental Research Center og U.S. Environmental Protection Agency:

Ved 51, 55, 58, 63 og 65°C, Naegleria overlevede henholdsvis ca. 30, 10, 5, 1 og <0,5 min.


Når det er sagt, er der ingen chance for det, bare ved at gå væk fra tallene fra publikationen Naegleria ville overleve i 15 minutter i 100°C kogende vand.


En mand døde efter at have fået en hjernespisende amøbe fra et vandland: Hvad du behøver at vide

Uger efter at have besøgt et vandland i North Carolina, er en mand død af en hjerneædende amøbe, hvilket får folk til at stille spørgsmålstegn ved sikkerheden ved den populære sommeraktivitet.

Eddie Gray tilbragte den 12. juli i Fantasy Lake vandland i Cumberland County, North Carolina med sin kirkemissionsgruppe. North Carolina sundhedsmyndigheder mener, at han pådrog sig Naegleria fowleri, en amøbe, der naturligt findes i varmt ferskvand om sommeren, ved den menneskeskabte sø.

Tilfælde af hjernespisende amøber er ekstremt sjældne —, mens millioner af svømmere hvert år tager til vandet i USA, kun omkring 0 til 8 personer får det. Men før du tager til vandlandet, er her, hvad du skal vide for at være sikker.

Hvad er hjernespisende amøbe egentlig?

Naegleria fowleri, almindeligvis omtalt som hjernespisende amøbe, er en encellet levende organisme, der kan forårsage en sjælden og næsten altid dødelig infektion i hjernen kaldet primær amebisk meningoencephalitis (PAM). Ifølge en rapport fra Centers for Disease Control har kun tre personer i USA ud af 138 fra 1962 til 2015 overlevet infektionen.

Hvor bor den?

Hjerneædende amøbe findes oftest i varmt ferskvand såsom søer, floder og varme kilder. Det opholder sig også i dårligt vedligeholdte eller minimalt klorerede swimmingpools, og opholder sig i disse levesteder for at fodre med bakterier.

𠇊moeba er naturligt forekommende, så den kan være til stede i ethvert friskvandsområde, sagde talskvinde Mirna Chamorro, Florida Department of Health i Orange County, tidligere til PEOPLE.

Størstedelen af ​​infektioner fra amøber er forekommet i � sydlige delstater, hvor mere end halvdelen af ​​alle infektioner forekommer i Texas og Florida,” ifølge CDC. Naegleria findes ikke i saltvand.

Hvordan kontrakter folk det?

Du kan ikke få amøben ved blot at sluge vandet, mens du svømmer, “ men kan være dødelig, hvis man tvinges op i næsen, som det kan forekomme under dykning, vandski eller andre vandaktiviteter,” ifølge North Carolina’s afdeling af Sundhed og Human Services.

RELATERET VIDEO: Hvad du behøver at vide om Naegleria Fowleri, The Brain-Eating Amoeba

Hvordan ved jeg, om jeg har det?

Symptomer på hjernespisende amøbe starter generelt en til ni dage efter nasal eksponering, og mange mennesker dør inden for 18 dage efter at have vist symptomer, ifølge CDC. Disse omfatter svær hovedpine, feber, kvalme og opkastning i første fase, og stiv nakke, kramper, ændret mental status, hallucinationer og koma i anden fase. Desværre er PAM, infektionen forårsaget af amøben, i sidste ende svær at opdage på grund af den hurtige udvikling af sygdommen. Diagnosen stilles typisk postmortem.

Tester embedsmænd for amøbe i vandområder?

CDC anbefaler ikke at teste vandmasser for hjernespisende amøber, fordi det er naturligt forekommende, hvilket betyder, at der ikke er nogen etableret sammenhæng mellem påvisning eller koncentration af naegleria fowleri og risiko for infektion, sagde Chamorro.

At teste vand giver ikke folk al den information, de behøver for at træffe en informeret beslutning, før de svømmer i en vandmasse.

“IDet kan måske give en falsk følelse af sikkerhed, sagde hun. “Ter kan være amøber på den ene side af en sø, men ikke på den anden side. Det kan også findes i sediment.”

Hun tilføjer, “Segne, der advarer mod amøber, placeres normalt ikke i nærheden af ​​vandmasser på grund af dette.”

Hvad kan jeg gøre for at undgå amøbe?

Selvom infektion er sjælden, er der i øjeblikket ingen metode til at reducere antallet af amøber i vand. På sin hjemmeside siger CDC, at det på grund af dette er uklart, hvordan en standard kan sættes til at beskytte menneskers sundhed, og hvordan offentlige sundhedsmyndigheder vil måle og håndhæve en sådan standard.”

Den eneste garanterede måde at undgå en hjernespisende amøbeinfektion er at afstå fra at deltage i vandrelaterede aktiviteter i varmt ferskvand. ȁKAN alle, der nyder tid i en vandmasse, dække deres næse, før de går ind, eller bruge næseklemmer,” siger Chamorro. "Så længe de ikke sætter hovedet under vand, er de okay.”"


Gratis Living Amebic-infektioner

Fritlevende ameber tilhørende slægterne Acanthamoeba, Balamuthia, Naegleria og Sappinia er sjældne årsager til sygdom hos mennesker og dyr.

Acanthamoeba spp. og Balamuthia mandrillaris er fritlevende ameber, der er i stand til at forårsage granulomatøs amebisk encephalitis (GAE). Acanthamoeba er en vigtig årsag til alvorlig keratitis blandt kontaktlinsebrugere og kan også forårsage kutane læsioner, især hos immunkompromitterede personer. Fordi artsniveauidentifikation ikke typisk udføres på Acanthamoeba tilfælde, er hele spektret af patogene arter inden for slægten ikke kendt, men arter, der vides at inficere mennesker omfatter A. byersi, A. castellanii, A. culbertsoni, A. hatchetti, A. healyi, A. astroonyxix, A. divionensis og A. polyphaga. B. mandrillaris kan også forekomme i forbindelse med hudlæsioner. Naegleria fowleri producerer en akut og sædvanligvis dødelig sygdom i centralnervesystemet (CNS) kaldet primær amebisk meningoencephalitis (PAM). Sappinia pedata har været impliceret i et menneskeligt tilfælde af amebisk encephalitis.

Livscyklus

Acanthamoeba spp.

Acanthamoeba spp. er allestedsnærværende i miljøet og er blevet fundet på en række forskellige steder, herunder frisk jord, brakvand og havvand mark-dyrkede grøntsager spildevand svømmebassiner kontaktlinser forsyninger medicinske pools tandbehandlingsenheder dialysemaskiner varme-, ventilations- og airconditionsystemer og postevandspattedyrcellekulturer og grøntsager. Acanthamoeba har cyster i to stadier og trophozoiter i sin livscyklus og mangler et flagellat stadium. Trophozoitterne replikerer ved mitose (kernemembranen forbliver ikke intakt) . Trophozoitterne er de infektiøse former, selvom både cyster og trophozoitter kan trænge ind i kroppen gennem forskellige midler. Indtrængen kan ske gennem øjet , næsepassagerne til de nedre luftveje eller sår eller ødelagt hud . Hvornår Acanthamoeba spp. kommer ind i øjet kan det forårsage alvorlig keratitis hos ellers raske personer, især kontaktlinsebrugere . Når det kommer ind i åndedrætssystemet eller gennem huden, kan det invadere centralnervesystemet ved hæmatogen spredning og forårsage granulomatøs amebisk encephalitis (GAE) eller spredt sygdom eller hudlæsioner hos personer med nedsat immunforsvar. Begge Acanthamoeba spp. cyster og trophozoiter findes i væv.

Balamuthia mandrillaris

Balamuthia mandrillaris er blevet isoleret fra jord og støv, og også fra obduktionsprøver af inficerede mennesker og dyr. B. mandrillaris har to stadier, cyster og trophozoiter i sin livscyklus og mangler et flagellat stadium. Trophozoitterne replikerer ved mitose (kernemembranen forbliver ikke intakt) . Trophozoitterne er de infektiøse former, selvom både cyster og trophozoitter kommer ind i kroppen gennem forskellige midler. Indtrængen kan ske gennem næsepassagerne til de nedre luftveje eller sår eller ødelagt hud . Hvornår B. mandrillaris kommer ind i åndedrætssystemet eller gennem huden, kan det invadere centralnervesystemet ved hæmatogen spredning og forårsage granulomatøs amebisk encephalitis (GAE) eller spredt sygdom eller hudlæsioner . B. mandrillaris cyster og trophozoitter findes i væv, nogle få tilfælde er blevet forbundet med solid organtransplantation fra en inficeret donor.

Naegleria fowleri

Naegleria fowleri har tre stadier i sin livscyklus: cyster , trophozoiter , og flagellerede former . Trophozoitterne replikerer ved promitose (kernemembranen forbliver intakt) . N. fowleri findes i ferskvand, jord, termiske udledninger fra kraftværker, geotermiske brønde og dårligt kloreret rekreativt vand og postevand. Trofozoitter kan blive til midlertidige ikke-fødende flagellerede former, som normalt vender tilbage til trofozoitstadiet. Trophozoitter inficerer mennesker eller dyr ved at trænge ind i næseslimhinden, normalt under svømning eller bihuleskylning og migrerer til hjernen via olfaktoriske nerver, der forårsager primær amebisk meningoencephalitis (PAM). Naegleria fowleri trophozoitter findes i cerebrospinalvæske (CSF) og væv, mens flagellerede former lejlighedsvis findes i CSF. Cyster ses ikke i hjernevæv.

Værter

Der er ingen større reservoirvært, da disse ameba-arter er fritlevende i miljøet og kun er opportunistisk parasitære. Imidlertid er sådanne infektioner blevet dokumenteret i en række forskellige dyrearter.

Geografisk fordeling

Disse ameber forekommer over hele verden i vand og jord nedenfor er en oversigt over de steder, hvor menneskelige infektioner vides at have fundet sted:

Acanthamoebaspp.: Acanthamoeba-associeret keratitis forekommer på verdensplan overvejende blandt kontaktlinsebrugere. Tilfælde af Acanthamoeba-associerede GAE er også blevet rapporteret bredt.

Balamuthia mandrillaris: Indberetninger af B. mandrillaris infektioner stammer primært fra Amerika, især Latinamerika, med begrænsede tilfælde rapporteret fra Asien, Australien og Europa. I USA er der rapporteret mange tilfælde fra sydvestlige stater. Mange tilfælde rapporteret fra Peru har involveret udvikling af hudlæsioner i ansigtet.

Naegleria fowleri: Tilfælde er blevet rapporteret på alle beboede kontinenter. De fleste tilfælde i USA er blevet forbundet med varmt ferskvandseksponering i sydlige stater. Der har dog været rapporteret tilfælde fra nordlige stater i sommermånederne.

Det enkelte rapporterede tilfælde af infektion med Sappinia pedata i et menneske blev identificeret i Texas.

Klinisk præsentation

Acanthamoeba spp.: Dissemineret infektion viser sig typisk som betændelse i lunger eller bihuler og/eller hudinfektioner, men har potentiale til at sprede sig til hjernen. GAE har en kronisk debut, der gradvist forværres over en periode på uger til måneder. Tegn og symptomer er typiske for meningoencephalitis og encephalitis og involverer varierende grader af neurologisk svækkelse. Der er meget få kendte overlevende fra GAE.

Acanthamoeba keratitis er oftest ensidig, og individuelle øjensymptomer varierer. Et karakteristisk cirkulært stromalt infiltrat kan blive tydeligt i iris. Hornhindeulceration og ardannelse kan forekomme, hvis den ikke behandles. Selvom det i høj grad er forbundet med kontaktlinsebrug, er der forekommet tilfælde, der opstår uden kontaktlinser.

Kutan acanthamebiasis viser sig som en enkelt eller dissemineret kronisk hudlæsioner, som oftest er skorpe eller sår, de kan være indurerede eller have en sårskorpe. Hudinfektioner forårsaget af Acanthamoeba kan fremstå som rødlige knuder, hudsår eller bylder i huden. Læsionerne kan forveksles med svampe- eller mykobakteriel hudinfektion, kutan amebiasis forårsaget af Entamoeba histolytica eller kutan leishmaniasis. Disse kan forekomme med eller uden samtidig sygdom i centralnervesystemet.

Balamuthia mandrillaris: Infektion med B. mandrillaris indebærer et lignende forløb til Acanthamoeba-tilhørende GAE. Sygdommen kan virke mild i starten, men kan blive mere alvorlig over uger til flere måneder. Ofte er sygdommen dødelig med en dødelighed på mere end 89 %. Plak-lignende hudlæsioner, oftest i ansigtet, især i kind- eller næseområdet, men nogle gange på torso eller lemmer kan gå uger eller måneder forud for udviklingen af ​​neurologiske symptomer.

Naegleria fowleri: PAM er karakteriseret ved alvorlig CNS-dysfunktion med hurtig degeneration forårsaget af hæmoragisk-nekrotiserende meningoencephalitis. I modsætning til GAE, indtræder PAM-symptomer hurtigt efter infektion (median 1-9 dage 5 dage efter svømning eller anden nasal eksponering for Naegleria-indeholdende vand). Symptomerne ligner bakteriel meningitis, som den ofte forveksles med, med forringet neurologisk funktion og komplikationer. Antallet af dødsfald er ekstremt højt.

Acanthamoeba spp. cyster.

Cysterne af Acanthamoeba spp. er typisk 10&mdash25 µm i diameter. Cysterne har en to-lags væg med porer: en rynket fibrøs ydervæg (exocyste) og en indre væg (endocyste), der kan være sekskantet, sfærisk, stjerneformet eller polygonal. Cyster indeholder kun en kerne med et stort karyosom. Cyster kan findes i hjernen, øjnene, huden, lungerne og andre organer.

Acanthamoeba spp. trophozoitter.

Trofozoitter af Acanthamoeba spp. er pleomorfe og måler cirka 15&mdash45 &mikrom. De har ofte flere rygsøjlelignende processer kaldet acanthapodia. Trophozoitter indeholder en stor kerne med et stort, centralt placeret karyosom, men ingen perifer kromatin. Der er ingen flagelleret trofozoitstadie i Acanthamoeba spp.

Balamuthia mandrillaris cyster.

Cysterne af Balamuthia mandrillaris er morfologisk meget lig de af Acanthamoeba spp. og er også typisk 10&mdash25 µm (gennemsnitlig 15 µm) i diameter. Generelt kan disse ikke pålideligt skelnes fra Acanthamoeba spp. uden hverken molekylær bekræftelse eller elektronmikroskopi. Cysterne har to vægge, der er synlige i lysmikroskopi, og har ikke porer: en rynket fibrøs ydre væg (exocyste) og en indre væg (endocyste), der kan variere i form. Et tredje lag (mesocyst) er kun synligt via elektronmikroskopi. Cyster indeholder kun en kerne med et stort karyosom. Cyster kan findes i hjernen, huden, lungerne og andre organer.

Balamuthia mandrillaris trophozoitter.

Trofozoitter af Balamuthia mandrillaris er pleomorfe og måler cirka 15&mdash60 &mikrom. De producerer ofte lange pseudopodier (bredere end dem af Acanthamoeba spp.). Trophozoitter indeholder en stor kerne med et stort, centralt placeret karyosom, men ingen perifer kromatin. Binukleforme er sjældne. Der er ingen flagelleret trofozoitstadie i B. mandrillaris.

Naegleria fowleri cyster.

Naegleria fowleri danner ikke cyster i humant væv. Cyster i miljøet og kulturen er sfæriske, 7-15 &mikrom i diameter og har en glat, enkeltlags væg. Cyster har en enkelt kerne.

Naegleria fowleri trophozoitter.

Der er to former for trophozoitter i Naegleria fowleri: ameboid og ameboflagellat, hvoraf sidstnævnte kun sjældent findes hos mennesker (inden for CSF). De ameboide trophozoitter måler 10-35 µm, men når de er afrundede er de normalt 10&mdash15 µm i diameter. I kultur kan trophozoitter vokse til over 40 &mikrom. Cytoplasmaet er granulært og indeholder mange vakuoler. Den enkelte kerne er stor og har et stort tæt karyosom og mangler perifert kromatin.

Sappinia spp. cyster og trophozoitter.

Sappinia er en slægt af fritlevende ameber, der sjældent er isoleret fra menneskelige prøver. Slægten findes over hele verden og er blevet isoleret i afføringen fra mange dyr, herunder pattedyr og krybdyr. Cyster og trophozoiter har begge to kerner.

Indirekte immunfluorescens (IIF) assay for fritlevende amebiske infektioner.

Brutto patologibilleder i fritlevende amebiske infektioner.

Laboratoriediagnose

Acanthamoeba spp.: Acanthamoeba infektion kan diagnosticeres ved påvisning af trophozoiter og cyster ved mikroskopisk undersøgelse af farvede udstrygninger af biopsiprøver (hjernevæv, hud, hornhinde) eller af hornhindeafskrabninger. Lactophenol blå, acridin orange, sølv og calcofluor hvide pletter er blevet brugt til diagnosticering af acanthamoebiasis på histologiske snit og miljøprøver (dvs. indhold af pelleteret kontaktlinsehylster). I tilfælde af granulomatøs amebisk encephalitis findes trophozoitter og cyster kun sjældent i CSF. Acanthamoeba kan dyrkes fra kliniske og miljømæssige prøver i laboratoriet på ikke-næringsstof agar med en Page&rsquos saltvand og Escherichia coli overlejring.

Konfokal mikroskopi eller dyrkning af den kausale organisme og dens identifikation ved direkte immunfluorescerende antistof kan også vise sig nyttig. Når der er et stort antal cyster og/eller trophozoiter, som i meget alvorlige tilfælde, kan diagnose være mulig gennem direkte mikroskopi på hornhindeafskrabninger eller kontaminerede overflader (dvs. kontaktlinsehylstre). Et stigende antal PCR-baserede teknikker (konventionel og realtids-PCR) er blevet beskrevet til påvisning og identifikation af fritlevende amebiske infektioner i de kliniske prøver anført ovenfor. Sådanne teknikker kan være tilgængelige i udvalgte diagnostiske referencelaboratorier.

Balamuthia mandrillaris infektion er generelt diagnosticeret post mortem. Uden for molekylær detektion via PCR og for nylig, metagenomisk dyb sekventering, B. mandrillaris detekteres mest pålideligt via immunfluorescens eller immunoperoxidasefarvning af vævsprøver.

Til Naegleria fowleri infektioner, kan diagnosen stilles ved mikroskopisk undersøgelse af cerebrospinalvæske (CSF). Det kan være muligt at detektere bevægelige trophozoiter på en våd mount, og en Giemsa-farvet udstrygning vil vise trophozoiter med typisk morfologi. PCR kan bruges til at påvise tegn på N. fowleri i CSF og hjernevæv. Amebic kultur på ikke-næringsstof agar plader overlejret med en fin græsplæne af Escherichia coli øger sandsynligheden for påvisning ved mikroskopiske metoder. (Mere om diagnose af N. fowleri infektioner).

Realtids PCR

En real-time PCR blev udviklet på CDC til identifikation af Acanthamoeba spp., Naegleria fowleri, og Balamuthia mandrillaris i kliniske prøver. * Dette assay retter sig mod 18S små ribosomale RNA-gensekvenser af små underenheder og bruger forskellige primere og TaqMan-prober til samtidig identifikation og differentiering af disse tre parasitter.

* Qvarnstrom Y, Visvesvara GS, Sriram R, da Silva AJ. Multiplex real-time PCR assay til samtidig påvisning af Acanthamoeba spp., Balamuthia mandrillaris, og Naegleria fowleri. J Clin Microbiol 200644(10):3589-3595.

Laboratoriesikkerhed

Frilevende ameber kan udgøre en potentiel sikkerhedsrisiko for laboratoriepersonale, især når der er et stort antal i kulturen. Personligt beskyttelsesudstyr (laboratoriekjole og handsker med øjenbeskyttelse) bør altid bæres, og andre passende BSL-2-forholdsregler bør tages. Personer med immunsuppressive sygdomme eller åbne sår i udsatte områder af huden kan have større risiko for infektion, når de arbejder med kulturer af frit levende amebae.

Foreslået læsning

Naegleria fowleri: Siddiqui, R., Ali, I.K.M., Cope, J.R. og Khan, N.A., 2016. Biologi og patogenese af Naegleria fowleri. Acta Tropica, 164, s. 375-394.
Yderligere information og FAQ på Naegleria fowleri

Acanthamoeba spp.: Lorenzo-Morales, J., Khan, N.A. og Walochnik, J., 2015. En opdatering vedr. Acanthamoeba keratitis: diagnose, patogenese og behandling. Parasit, 22.
Yderligere information og FAQ på Acanthamoeba spp.

Balamuthia mandrillaris: Lorenzo-Morales, J., Cabello-Vílchez, A.M., Martín-Navarro, C.M., Martínez-Carretero, E., Piñero, J.E. og Valladares, B., 2013. Er Balamuthia mandrillaris et folkesundhedsproblem på verdensplan?. Tendenser i parasitologi, 29(10), s. 483-488.
Yderligere information og FAQ på Balamuthia mandrillaris

Sappinia spp.: Walochnik, J., Wylezich, C. og Michel, R., 2010. Slægten Sappinia: Historie, fylogeni og medicinsk relevans. Eksperimentel parasitologi, 126(1), s. 4-13.


Mikrobiologer af reddit, hvis amøben Naegleria Fowleri er så almindelig i søer, jord, vand og mennesker er i tæt kontakt med den, hvorfor er det så svært at blive smittet af den?

Jeg ved godt at man skal få vandet op i næsen, dog går jeg ud fra der er tusindvis af mennesker hvert år der får vand fra søer (hvor amøben trives) op i næsen. Jeg har læst mange artikler om det, men ingen klar forklaring på hvorfor det er så sjældent at få det. Skal det være meget vand? Bare et drys? Kunne du ikke indånde damp med amøben?

Edit: Tak for svarene! Der er mange opsigtsvækkende artikler derude og lidt videnskabelig information tilgængelig. Jeg ville gerne have en god lille diskussion om emnet for at forstå noget så sjældent lidt bedre. Jeg har også en ven, der konstant bekymrer sig om dette, når hun ser en vandpyt, flod, sø osv., og jeg vil gerne have nogle solide argumenter for at berolige hende.

Det er en opportunist (den lever lykkeligt for sig selv, har ikke brug for os), og det er virkelig ret svært at blive smittet. Amøben skal bane sig vej gennem en knogleplade via lugtenerverne for at komme til hjernen.

De højeste risikoaktiviteter er, når vand med magt skydes op i næsen, klassikeren er en person, der falder fra vandski på en sø, selvom der for nylig har været tilfælde forbundet med brug af enheder såsom netti-potter med ikke-sterilt vand.

Interessant, jeg læste om, hvordan vandet skal presses op i næsen. Ville den benede plade være grunden til det? Som i, skal vandet indåndes for at vandet kan beskadige den plade? Eller er amøben i stand til at spise sig igennem det?

Hej. Det her lort er mit jam, men husk på, at jeg ikke taler i nogen officiel egenskab. Jeg vil starte med dit sidste spørgsmål først: teoretisk set, ja, bare et drys kunne få dig. Murine modeller har bevist en smitsom belastning på kun en enkelt ameba. Cysterne har vist sig at være luftbårne, men Naegleria er ikke kendt for at excystere i menneskeligt væv (jeg tror, ​​undskyld mig, jeg har ikke min Endnote tilgængelig derhjemme), så dampen er nok ikke en stor sag. Jeg vil også gætte på, at en form for osmotisk shock er nødvendig for at forårsage infektionen, fordi det er det, der får dem til at enflagellere. Den flagellerede form spiser ikke, men er sandsynligvis nødvendig for at disse små helvede kan komme så langt op i næsehulen, som de behøver for at begynde at gumle. Trofozoitterne bevæger sig ret godt, men de flagellerede former booker det fandme. Plus, som nævnt i andre svar, har de brug for noget temmelig varmt vand for selv aktivt at formere sig i første omgang, og cyster er meget mere udsat for udtørring end ægte ameber.


Mens du ringer om sommeren, glem ikke at huske vigtigheden af, hvad vi har fri til.

Hjem for de frie på grund af de modige.

"Det amerikanske flag flyver ikke, fordi vinden bevæger det. Det flyver fra det sidste åndedrag fra hver soldat, der døde, og beskytter det."

På denne dag i Amerika har vi i øjeblikket over 1,4 millioner modige mænd og kvinder aktivt opført i de væbnede styrker for at beskytte og tjene vores land.

I øjeblikket er der en øget andel på 2,4 millioner pensionister fra det amerikanske militær

Omtrent har der været over 3,4 millioner dødsfald af soldater, der kæmper i krige.

Hvert eneste år ser alle frem til Memorial Day Weekend, en weekend, hvor strandene bliver overfyldte, folk fyrer op til grillen til en sjov solrig BBQ, simpelthen en stigning i sommeraktiviteter, som en "pre-game", før sommeren begynder.

Mange amerikanere har glemt den sande definition af, hvorfor vi har det privilegium at fejre Memorial Day.

Kort sagt er Memorial Day en dag til at holde pause, huske, reflektere og ære de faldne, der døde for at beskytte og tjene for alt, hvad vi har frihed til at gøre i dag.

Tak fordi du trådte frem, når de fleste ville have trådt tilbage.

Tak for de gange, du savnede med dine familier, for at beskytte min.

Tak fordi du involverede dig selv, vel vidende at du var nødt til at stole på tro og andres bønner for din egen beskyttelse.

Tak fordi du er så uselvisk og sætter dit liv på spil for at beskytte andre, selvom du slet ikke kendte dem.

Tak fordi du gjorde det hårdt og er frivillig til at repræsentere os.

Tak for din dedikation og flid.

Uden jer ville vi ikke have den frihed, vi er givet nu.

Jeg beder om, at du aldrig får udleveret det foldede flag. Flaget er foldet for at repræsentere de oprindelige tretten kolonier i USA. Hver fold har sin egen betydning. Ifølge beskrivelsen symboliserer nogle folder frihed, liv eller hylder mødre, fædre og børn af dem, der tjener i Forsvaret.

Så længe du lever, så bed konstant for de familier, der får overrakt det flag, da nogen lige har mistet en mor, mand, datter, søn, far, kone eller en ven. Hver person betyder noget for nogen.

De fleste amerikanere har aldrig kæmpet i en krig. De har aldrig snøret deres støvler og gik i kamp. De behøvede ikke at bekymre sig om at overleve indtil næste dag, da der gik skud omkring dem. De fleste amerikanere ved ikke, hvordan den oplevelse er.

Men nogle amerikanere gør, som de kæmper for vores land hver dag. Vi er nødt til at takke og huske disse amerikanere, fordi de kæmper for vores land, mens resten af ​​os forbliver sikre hjemme og væk fra krigszonen.

Tag aldrig for givet, at du er her, fordi nogen kæmpede for, at du skulle være her, og glem aldrig de mennesker, der døde, fordi de gav dig den ret.

Så mens du er ude og fejre denne weekend, så drik til dem, der ikke er med os i dag, og glem ikke den sande definition af, hvorfor vi fejrer Memorial Day hvert år.

"...Og hvis ord ikke kan tilbagebetale den gæld, vi skylder disse mænd, må vi med vores handlinger stræbe efter at bevare troen med dem og med den vision, der førte dem til kamp og til endelige offer."


Amøbe proteus

Amøbe proteus er en mikroskopisk organisme med en stor celle. Det er tilgængeligt hos de fleste videnskabsforsyningsvirksomheder, der sælger levende organismer og bruges ofte af skoler. I naturen lever den i ferskvandsområder, såsom damme. Den lever af mindre encellede væsner, alger og hjuldyr. Rotifer er flercellede væsner, men er mindre end mange encellede. Der er andre amøber i damvand, men Amøbe proteus er en god en for eleverne at observere på grund af dens størrelse. Det er vist i videoen nedenfor.

Fodring

En amøbe ser ud til at udvide pseudopoder med formål, når den er i stand til at forsøge at fange sit bytte, men den kan faktisk reagere på specifikke stimuli skabt af byttets tilstedeværelse. Forskere har opdaget, at pseudopoder produceres på grund af en række forskellige stimuli, herunder kemiske gradienter, temperaturgradienter og elektriske felter.

Amøben strækker sine pseudopoder rundt og over sit bytte og fanger det i en dråbe vand. Amøbens cellemembran omgiver til sidst byttet på alle sider og danner en fødevakuole, som er inkorporeret i amøbens krop. Denne fodringsmetode kaldes fagocytose. Når byttet er fanget, kommer fordøjelsesenzymer ind i fødevakuolen. Disse dræber byttet og fordøjer det

Folk er nogle gange forbløffede over, at et så langsomt bevægende væsen som en amøbe kan fange så hurtigtsvømmende væsner som dem, der er vist i videoen ovenfor. Amøbens manglende hastighed er faktisk en fordel, fordi dens bytte måske ikke opdager, at den er omringet.

Reproduktion

Amøbe proteus formerer sig ved en proces kaldet binær fission, som er en form for aseksuel reproduktion. Først deler cellens kerne sig i to kerner og derefter deler cellen sig i to celler. En kerne går ind i hver af "datter"-cellerne, som snart forstørres til at blive størrelsen af ​​forældrecellen.

Oplysningerne nedenfor er givet af almen interesse. Enhver med uforklarlige, alvorlige eller tilbagevendende symptomer på dårligt helbred bør besøge en læge for at få en diagnose og behandling. Lægen vil være i stand til at besvare folk & stille spørgsmål om sygdommen.


Infektion forårsaget af Naegleria fowleri forveksles ofte med at være bakteriel eller viral meningitis. Tilstanden er svær at diagnosticere på grund af dens uspecifikke tidlige symptomer. For at diagnosticere tilstanden bruger lægen følgende tests:

  • Direkte visualisering: I metoden opsamles CSF (cerebrospinalvæske) fra patientens krop og undersøges under mikroskop for at identificere amøben.
  • Antigenpåvisning: Dette er en hurtig proces, hvor antistoffer bruges til at påvise tilstedeværelsen af ​​antigener i vævene [9].
  • Polymerase kædereaktion test: En test, hvor et specifikt molekylært værktøj bruges til at amplificere DNA fra amøben for let at identificere dem [10].

Andre tests inkluderer CT-scanning og MR for at opdage hævelsen i hjernen.


Naegleria Amøbe

Hvordan vi kan holde fremtidige svømmere sikre i Lake Havasu

I de seneste nyheder har den tragiske historie om en ung Lake Havasu teenager, der døde, led af en dødelig infektion af Naegleria fowleri, en fritlevende amøbe, som almindeligvis findes i varmtvandssøer.

Vi har modtaget et par opkald og e-mails, der spørger os, om det er farligt at svømme i Lake Havasu, og spekulerer på, om de skulle finde en ny ferskvandssø. Vores svar, hvis du vil undgå Naegleria fowleri helt, så undgå ALLE varmtvandssøer, varme kilder, damme, floder og et par svømmebassiner.

Det er selvfølgelig lidt drastisk, og ifølge eksperternes oplysninger unødvendigt. Ja, du KAN svømme sikkert i Lake Havasu og andre varme vandområder, men der er nogle ting, du skal vide.

For det første, på trods af det faktum, at Naegleria fowleri findes over hele verden, inklusive et flertal af ferskvandssøerne i USA, er tilfælde af infektioner ekstremt sjældne. Ifølge en kilde blev der kun dokumenteret 23 tilfælde i USA mellem 1995 og 2004.

Naegleria Amoeba er ikke begrænset til en bestemt lokal

Denne amøbe findes almindeligvis i varmt, lavt og stillestående vand. Hvor varmt er varmt? 80 grader og højere er temperaturen rapporteret i artikler, jeg har læst.

Men blot at svømme i varmt vand er ikke nok til at forårsage et problem. Amøben skal ind i kroppen gennem næsen, og ifølge litteraturen skal den ind i næsen via en voldsom vandstrøm, såsom dykning.

Faktum er, at uanset hvor du er, hvis vandet er meget varmt, ikke bevæger sig og lavt, vil der vokse nogle ubehagelige ting. Simpel biologi.

Jeg bryder mig ikke om at dyppe mit hoved under vand, men hvis børn insisterer på, at de vil lave nogle voldsomme skæringer, ville jeg finde køligere vand (hvilket endda er muligt i Havasu i de varmere måneder ved blot at skifte placering), eller har de bærer en næseklemme.

Alligevel er det ikke nok at gå under vandet til at blive smittet. Normalt skal amøben føres kraftigt op i næsen, enten ved at dykke ned i vandet eller på anden måde.

Hvad med vandski, hvis du tager en uventet wipe-out? Normalt står vi på ski i køligere og dybere vand, hvor amøben typisk ikke findes.

Beskyt dig selv gennem uddannelse

I bund og grund mener jeg, at det er vigtigt at forstå mulige farer, lære om truslen og derefter tage skridt til at forebygge.

I know the father of the young teen who died stated he would never let his children swim in Lake Havasu again. I understand his feelings. If my child drowned in a particular swimming pool or body of water, I would never want to see that body of water ever again.

This particular threat, although extremely rare, is not unique to Lake Havasu. If our goal is to protect our families, we need to take certain precautions when visiting any fresh water lake or other bodies of water. In Havasu the weather is already cooling, which means our water temperatures are also dropping. But next summer, when those water temperatures get above 80 degrees, we should be wearing a nose clip if we want to swim with our heads under water or do any major cannon ball jumping.

What do experts have to say on this issue? According to a recent quote by Dr. Rebecca Suneshine, deputy state epidemiologist of the Arizona Department of Health, “I would swim in Lake Havasu…and I would let my children swim there.” She went on to say the infection was incredibly rare.

Bobbi Holmes, October 5, 2007

Del dette:

5 comments on &ldquo Life threatening dangers of swimming during times of excessive heat: Naegleria fowleri amoeba &rdquo

Hej.
I’ve read several articles and done sum research on lake Havasu..
Summer time the heat in the LHC lake area is very hot..
So definitely a danger in that respect..
But at all times of the year you have algee..
Which comes up off the bottom of the lake in the shallows..
I’ve been coming hear for a number of years now..
Winter and summer..
I’ve experienced an ear infection the last couple of years.
I was to believe it was from camping in the desert.
Due to the wind that blows..kicking up dust and sand etc etc..
But apon further research..
I’m beginning to believe it’s caused due to me swimming almost daily in LHC..
One of the main reasons I come here..
Research for your self.
Things like.
Where does LHC get there drinking water.?
Where does the sewage go..
What can breed in the water and be there year round.
Is there a situation caused due to boats / and other water craft used in this lake.
Remember.. this a lake.
The water isn’t draining at a constant flow like a river..
I have noticed there’s a big sign at Waters edge that lights up and flashes.
That warns people not to go in the lake due to excess amounts of contamination..
Mostly due to water craft..I thinx.
Just FYI..
To each his own..
Thanx you very much.
I hope this helps in sum small way.

Our family first moved to Lake Havasu over fifty years ago. Growing up, I spent most of my days on the lake. In fact, when I was in high school, I drove a boat to school each day—by myself.

Lake Havasu is a water reservoir, providing drinking water for Southern California. It’s actually a very clean lake. While there might be some areas—like perhaps in the Channel where you get a high concentration of boats and people in a smaller area that might cause some issues—overall I believe it is a clean lake.

As for the deadly Naegleria fowleri amoeba, that can happen ANYWHERE when two conditions are present:
1. Excessive heat
2. Stagnant water

It’s certainly not an issue unique to Havasu, nor is it not something that should keep swimmers out of the lake. People just need to be smart about it.

When water temperature in any body of water exceeds 80 degrees, avoid certain activities in the back coves, where there is still or stagnate water. Those would include letting your kids do cannon balls, diving, or taking them skiing and tubing through those stagnate areas, for risk they be thrown off and into the water.

From what I have read, swimming alone in hot stagnate water is not the risk, it is having the water violently shoved up your ears.

Why would motor boats be allowed on any fresh water lake, esp. Drinking Water. Electric motors have been around for a long time.

Lake Havasu supplies water to several states. And there have always been motorboats allowed on it. Not uncommon. But the amoeba is an issue unrelated to boats. Heat and stagnate water. Actually, the motor boats stirring up the water might be a good thing.

Lake Havasu literally sits on a river the colorado river which opens their dams everyday which flows . It may be a called lake havasu but its not a lake in reality its the colorado river dammed up like the rest of it all the way to the Rockies.


Which of these diseases results in meningitis caused by an encapsulated yeast?

A. cryptococcosis
B. histoplasmosis
C. candidiasis
D. coccidiomycosis

What kind of stain is most commonly used to visualize the capsule of cryptococcus?

A. Gram stain
B. simple stain
C. negative stain
D. fluorescent stain

Which of the following is the causative agent of East African trypanosomiasis?

A. Trypanosoma cruzi
B. Trypanosoma vivax
C. Trypanosoma brucei rhodanese
D. Trypanosoma brucei gambiense

Which of the following is the causative agent of primary amoebic meningoencephalitis?

A. Naegleria fowleri
B. Entameba histolyticum
C. Amoeba proteus
D. Acanthamoeba polyphaga

What is the biological vector for African sleeping sickness?

A. mosquito
B. tsetse fly
C. deer tick
D. sand fly

How do humans usually contract neurocysticercosis?

A. the bite of an infected arthropod
B. exposure to contaminated cat feces
C. swimming in contaminated water
D. ingestion of undercooked pork

Which of these is the most important cause of adult onset epilepsy?

A. neurocysticercosis
B. neurotoxoplasmosis
C. primary amoebic meningoencephalitis
D. African trypanosomiasis


Materialer og metoder

Etikerklæring

The use of leftover CSF for making spiked samples was approved by the Ethics Committee of the Faculty of Tropical Medicine, Mahidol University (MUTM 2006–063) and the Ethics Review Committee for Research in Human Subjects, Ministry of Public Health, Thailand (Ref. No. 33/2550). A written informed consent form regarding the use of leftover CSF specimens for future research purposes was obtained from the patients. The CSF was completely anonymous and was not linked with the patients’ identification.

Parasites and bacteria

Naegleria fowleri, Naegleria gruberi, Acanthamoeba spp., trophozoites, isolated from environmental samples from our previous study [17] and confirmed by morphology, culture, mouse pathogenicity and sequencing.

Giardia duodenalis—cysts, cultured and confirmed by PCR.

Cryptosporidium parvum—oocysts, cultured and confirmed by PCR.

Entamoeba histolytica—trophozoites, cultured and confirmed by PCR.

Entamoeba coli—cysts, detected by morphology.

Toxoplasma gondii—oocysts, kindly provided by Prof. Marie Laure Darde, University Hospital, Department of Parasitology, Biological Resource Centre for Toxoplasma, Limoges, France.

Neospora caninum—tachyzoites, cultured and confirmed by PCR.

Blastocystis—confirmed by sequencing.

Enterocytozoon bieneusi—confirmed by sequencing.

Escherichia coli—kindly provided by the Department of Microbiology and Immunology, Faculty of Tropical Medicine, Mahidol University.

Cryptococcus neoformans—kindly provided by Prof. Srisurang Tantimavanich, Department of Clinical Microbiology, Faculty of Medical Technology, Mahidol University.

Mycobacterium tuberculosis—strain H37Rv, kindly provided by the Central Chest Institute of Thailand.

LAMP primer design

A set of five primers for LAMP were designed according to the published sequence of N. fowleri virulence-related protein (GenBank accession no. M88397) [18] using PrimerExplorer ver. 4 (http://primerexplorer.jp/elamp4.0.0/index.html). A forward inner primer (FIP), a backward inner primer (BIP), two outer primers (F3 and B3) and a loop primer (LB) were used for the LAMP. The primers were aligned and checked for specificity using NCBI GenBank and comparative genome Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) analysis. The oligonucleotide primers were synthesized with High Affinity Purification by Bio Basic Inc. (Ontario, Canada). The sequences and lengths of the primers are shown in Table 1.

LAMP assay.

The LAMP conditions were optimized with different parameters, including the concentrations of outer primers (0.1 to 0.4 μM), inner primers (1.2 to 2.0 μM), loop primer (0.2 to 1.0 μM), MgSO4 (5 to 10 mM), dNTPmix (1 to 2 mM), hydroxy naphthol blue (HNB) (80–160 μM), betaine (0 to 1 M), enzyme (2 to 10 U), assay temperature (60, 62, or 64°C) and incubation time (60, 90, or 120 min). Nine parameters, not including incubation time, were optimized one at a time and each optimization experiment was repeated three times. A non-template control (sterile water) as negative control and a positive control (DNA extracted from 100 N. fowleri trophozoites) were included for each LAMP run. The results were considered positive when the LAMP product showed a significant difference between positive amplification, i.e., when color changes from violet to sky blue and negative amplification, which remains violet with the presence or absence of the ladder-like pattern bands after electrophoresis. On the basis of the above optimization steps, the final reaction mixture (25 μl) contained 0.2 M each of outer primer (F3, B3), 1.6 M each of inner primer (FIP, BIP), 0.8 M of loop primer (LB), 1X of supplied ThermoPol buffer, 8 mM MgSO4 (New England Biolabs, Ipswich, MA, USA), 1.4 mM dNTP mix (Thermo Scientific, Vilnius, Lithuania), 0.8 M betaine (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), 120 μM HNB (Sigma-Aldrich), 8 units of Bst DNA polymerase (New England Biolabs) with 2 μl total DNA as a template. Amplification was conducted at 64°C for 60 min and terminated at 80°C for 5 min.

Specificity of the LAMP primers.

To investigate LAMP primer specificity, DNA templates isolated from organisms described earlier were subjected to LAMP. In addition, DNA extracted from CSF from non-PAM patients and healthy human blood were included in the test. The specificity test was repeated twice. Negative controls were included for all experiments.

Determinations of lower limit of detection by LAMP and PCR in spiked CSF and water samples with pure cultures

The lower limit of detection of the LAMP assay was determined using known amounts of N. fowleri in pure cultures. The trophozoites were counted under a microscope with a hemocytometer and further serial 10-fold dilutions were prepared in phosphate buffered saline (PBS), ranging from 10 4 –1 cells. N. fowleri in each dilution was added into each 250 ml of water collected from a pond which was previously tested to be free of N. fowleri by microscopy and PCR, and 200 μl of pooled leftover CSF from non-PAM patients. CSF was obtained from HIV patients with neurological abnormalities. The water samples with cells were then centrifuged at 2,500 rpm for 10 min at 20°C as described by Puzon et al. [19]. Supernatant was discarded and samples resuspended in 1 ml of PBS, transferred to a 1.5 ml tube and reconcentrated by centrifugation at 10,000 rpm for 10 min at 20°C. Supernatant was then removed by pipette, before samples were resuspended in 200 μl PBS. Genomic DNA was extracted using a QIAamp DNA minikit (Qiagen, Hilden, Germany). LAMP sensitivity was compared with the conventional nested PCR method for N. fowleri [9]. Spiking experiments with different concentrations were repeated three times. In addition, another set of spiked water and CSF samples were subjected to DNA extraction using the heating method to compare the sensitivity obtained with DNA extraction by a commercial kit, to shorten the total completion time and to simplify the LAMP assay for the feasible diagnosis of field samples. The last dilution with all three samples testing positive was considered as the detection limit.

DNA extraction and PCR assays

Genomic DNA was purified from the organisms listed above for specificity testing, the spiked dilutions for sensitivity test and the water samples for validating the LAMP, using a QIAamp DNA minikit (Qiagen, Germany) per manufacturer’s protocol and the DNA was eluted in 100 μl TE buffer. 2 μl of the DNA template was used in LAMP and PCR. The extracted DNA was stored at -80°C until use.

For DNA extraction by heating method, 200 μl of each spiked water dilution was heated directly at 95°C for 10 min without the centrifugation and resuspension steps. The samples were then centrifuged at 14,000 rpm for 10 min and 2 μl of the supernatant was used as the DNA template.

Classical nested PCRs from previously published primers targeting Mp2Cl5 sequence [9] were selected to compare and evaluate the sensitivity and efficiency of the LAMP. The forward primer, Mp2Cl5.for (5’-TCTAGAGATCCAACCAATGG-3’) and the reverse primer, Mp2Cl5.rev (5’-ATTCTATTCACTCCACAATCC-3’) were used in the first round of PCR amplification, which contained 1X Taq buffer, 2.5 mM MgCl2, 0.6 μM each of primer, 0.2 mM each of dNTP (Thermo Scientific, Vilnius, Lithuania), 2.5 units of Taq DNA polymerase (Thermo Scientific, Vilnius, Lithuania), and 2 μl of extracted DNA. Reactions were cycled 35 times with first denaturation at 95°C for 5 min, followed by denaturation at 95°C for 1 min, annealing at 65°C for 1 min and extension at 72°C for 2 min. Det Mp2Cl5.for-in (5’-GTACATTGTTTTTATTAATTTCC-3’) and Mp2Cl5.rev-in (5’-GTCTTTGTGAAAACATCACC-3’) primers which amplified 110-bp fragment products were used for the nested PCR. The mixtures for the second PCR were the same as in the first round, except that the concentration of each primer was 0.5 μM. Two microliters of the PCR product from the first-round PCR were used in the second PCR. The LAMP and PCR products (7.5 μl) were analyzed by 2% agarose gel electrophoresis, stained with ethidium bromide, and observed under UV transillumination.

Collection of environmental water samples for N. fowleri analyse

We conducted a survey for N. fowleri in Thailand to validate the applicability of the newly developed LAMP assay. Eighty water samples from different locations were collected from stagnant water around the houses and near the markets during the flooding crisis in Nakhon Pathom Province, Thailand, during November 2011. 30 water samples were collected from rivers, canals, rain (from a rainwater tank supplying a house), tap (from a public water distribution system), ground and underground water in Nan, Phayao, Kanchanaburi, Chantaburi, Trat, and Trang Provinces, Thailand, from January 2012 to December 2013 (S1 Fig). Samples were collected in sterile glass bottles and labeled with date, time, and place of collection. The water samples were processed in the manner described in US EPA Method 1623 with some modifications [20]. Briefly, 1,000 ml of water from each site were added to a sterile bottle and immediately sent to the laboratory. Each water sample was concentrated by multiple centrifugation steps (10 min at 3,500 rpm) and the pellet was resuspended in 1 ml of PBS, kept for DNA extraction using a QIAamp DNA minikit. Each sample was tested in triplicate by both LAMP and PCR assays.

All of the positive detection from environmental samples by LAMP were further tested for confirmation as N. fowleri by bidirectional sequencing of LAMP products [21]. To do this, 1 μl of LAMP product was used as template in a PCR reaction with primers that flank within the LAMP product of the N. fowleri virulence-related protein, F2 (5’- CAATGAAAGAAACTTTGCACCT-3’) and B2 (5’- TCCATCCATTTGGATCGG -3’) (0.3 μM each of primer), dNTPs (0.2 mM), Taq buffer (1X), MgCl2 (1.5 mM) and Taq DNA polymerase (1 unit) in final volume 25 μl. The reaction was run as follows: 2 minutes at 95°C, 35 cycles of 95°C 30 sec, 55°C for 30 sec, 72°C 30 sec, followed by 10 minutes extension at 72°C. The PCR product was run on an agarose gel, purified, and sequenced on an ABI3730xl DNA Analyzer (Applied Biosystems). The sequences were analyzed and identified using the MEGABLAST search program (http://www.ncbi.nlm.nih.gov) from the GenBank database.

Statistisk analyse

McNemar's test was used to test for differences between the LAMP and PCR detection rates. The test was 2-sided and exact probabilities were calculated. The agreement between LAMP and PCR was also calculated through the Kappa coefficient with 95% confidence level [22]. All analyses were conducted with SPSS for Windows 18.0 (SPSS Inc.).


The amoeba Naegleria fowleri, commonly found in warm swimming water, can cause a “brain-eating” disease that is almost always fatal. UCSD researchers have now identified a number of drugs able to inhibit its growth in the lab, including the breast cancer drug tamoxifen and antidepressant Prozac.

Prozac seems to have a lot of side uses and side effects discovered lately.

The title of the post is a copy and paste from the first two paragraphs of the linked academic press release here :

The amoeba Naegleria fowleri is commonly found in warm swimming pools, lakes and rivers. On rare occasions, the amoeba can infect a healthy person and cause severe primary amebic meningoencephalitis, a “brain-eating” disease that is almost always fatal. Other than trial-and-error with general antifungal medications, there are no treatments for the infection.

Researchers at Skaggs School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences at University of California San Diego have now identified three new molecular drug targets in N. fowleri and a number of drugs that are able to inhibit the amoeba’s growth in a laboratory dish. Several of these drugs are already approved by the U.S. Food and Drug Administration for other uses, such as antifungal agents, the breast cancer drug tamoxifen and antidepressant Prozac.

Wenxu Zhou, Anjan Debnath, Gareth Jennings, Hye Jee Hahn, Boden H. Vanderloop, Minu Chaudhuri, W. David Nes, Larissa M. Podust.

Enzymatic chokepoints and synergistic drug targets in the sterol biosynthesis pathway of Naegleria fowleri.

PLOS Pathogens, 2018 14 (9): e1007245

Naegleria fowleri is a free-living amoeba that can also act as an opportunistic pathogen causing severe brain infection, primary amebic meningoencephalitis (PAM), in humans. The high mortality rate of PAM (exceeding 97%) is attributed to (i) delayed diagnosis, (ii) lack of safe and effective anti-N. fowleri drugs, and (iii) difficulty of delivering drugs to the brain. Our work addresses identification of new molecular targets that may link anti-Naegleria drug discovery to the existing pharmacopeia of brain-penetrant drugs. Using inhibitors with known mechanism of action as molecular probes, we mapped the sterol biosynthesis pathway of N. fowleri by GC-MS analysis of metabolites. Based on this analysis, we chemically validated two enzymes downstream to CYP51, sterol C24-methyltransferase (SMT, ERG6) and sterol Δ8−Δ7 -isomerase (ERG2), as potential therapeutic drug targets in N. fowleri. The sterol biosynthetic cascade in N. fowleri displayed a mixture of canonical features peculiar to different domains of life: lower eukaryotes, plants and vertebrates. In addition to the cycloartenol→ergosterol biosynthetic route, a route leading to de novo cholesterol biosynthesis emerged. Isotopic labeling of the de novo-synthesized sterols by feeding N. gruberi trophozoites on the U13C-glucose-containing growth medium identified an exogenous origin of cholesterol, while 7-dehydrocholesterol (7DHC) had enriched 13C-content, suggesting a dual origin of this metabolite both from de novo biosynthesis and metabolism of scavenged cholesterol. Sterol homeostasis in Naegleria may be orchestrated over the course of its life-cycle by a “switch” between ergosterol and cholesterol biosynthesis. By demonstrating the growth inhibition and synergistic effects of the sterol biosynthesis inhibitors, we validated new, potentially druggable, molecular targets in N. fowleri. The similarity of the Naegleria sterol Δ8−Δ7 -isomerase to the human non-opioid σ1 receptor, implicated in human CNS conditions such as addiction, amnesia, pain and depression, provides an incentive to assess structurally diverse small-molecule brain-penetrant drugs targeting the human receptor for anti-Naegleria activity.

Sterols are important constituents of cell membranes. In a unicellurar organism, such as the human pathogen N. fowleri, the cell membrane delineates the physical boundaries of the cell and mediates interactions of the organism with its environment. N. fowleri is a free-living amoeba that may infect the human brain causing a fulminant infection called primary amebic meningoencephalitis (PAM). PAM has resulted in death in >97% of reported cases. Understanding the molecular and cellular biology of N. fowleri will facilitate the rational development of new therapeutic interventions. Using inhibitors targeting different enzymatic steps in the sterol biosynthesis pathway, we mapped metabolic intermediates and delineated the biosynthetic routes contributing to N. fowleri sterol homeostasis. An array of sterol molecules suggests that two different sterol types, ergosterol-like and cholesterol-like sterols, co-exist and may be dynamically regulated in N. fowleri. Disruption of sterol biosynthesis by drug candidates was detrimental to N. fowleri. Drugs targeting three different enzymatic steps resulted in growth inhibition effect. This effect was amplified when drugs targeting different enzymes were combined. The observed synergistic effect of these drugs lowers the individual drug concentrations required for biological activity including delivering anti-PAM drugs across the blood-brain-barrier.


Se videoen: 201706 - Meningoencefalitis amebiana primaria (August 2022).